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血漿解凍箱技術(shù)發(fā)展趨勢

文章錄入: 三江醫(yī)療  閱讀量: 1482  添加時間: 2021/09/15

在反相液相色譜中, 血漿解凍箱技術(shù)的發(fā)展趨勢是有機(jī)溶劑制備甲醇和乙腈常用的蛋白質(zhì)沉淀劑。酒精沉淀蛋白的優(yōu)點(diǎn)是上清液澄清,沉淀成絮狀,易于分離;乙腈相反,會產(chǎn)生細(xì)小的蛋白質(zhì)沉淀,但沉淀效率高于甲醇。4.2根據(jù)所需樣品的需要,用移液器將血漿(血清)定量抽入試管,并蓋上試管塞。

4.3必要時調(diào)整血漿(血清)溶液的酸堿度,根據(jù)樣品的性質(zhì)添加酸、堿或緩沖溶液。4.4血漿解凍盒技術(shù)發(fā)展趨勢:定量吸出含血漿(血清)的有機(jī)溶液,并覆蓋試管塞。4.5溶液中的混合有機(jī)溶劑使蛋白質(zhì)變性沉淀,從而分離與蛋白質(zhì)結(jié)合的藥物。與此同時,大多數(shù)樣品被提取到有機(jī)溶劑中。4.5.1渦流混合均勻,使試管在渦流混合器上產(chǎn)生渦流,保證樣品溶液的渦流充分混合,渦流時間一般為2-3分鐘。4.5.2將試管放在搖床上往復(fù)振動,通常振動5-10分鐘。4.6試管是用離心去除的蛋白質(zhì)從離心機(jī)中分離出來的,一般是3000-4000r/min。離心前注意平衡,加速時注意慢慢加速,防止試管破裂加速,一般離心時間為15-20分鐘。4.7離心分離后,將變性蛋白沉淀在試管底部,用移液器吸收上部有機(jī)溶液,然后轉(zhuǎn)移到另一管。4.8用0.45μm濾膜過濾原蛋白處理的樣品溶液。


4.9血漿解凍箱技術(shù)發(fā)展趨勢:高速離心將過濾樣品溶液轉(zhuǎn)移到EP管,25000-30000r/min處理。離心前注意平衡,加速時注意慢慢加速,防止試管破裂加速,一般離心時間為5-10分鐘。4.10上述處理后得到的樣品溶液,如果樣品濃度超過定量限值,且溶劑對HPLC系統(tǒng)無干擾,則可直接對樣品進(jìn)行分析。如果需要去除溶劑,如果樣品濃縮或干燥,則使用相同的3.8-3.9。4.11存放預(yù)處理樣品的樣品應(yīng)存放在冰箱冷藏室,樣品應(yīng)垂直放置,排列整齊,編號準(zhǔn)確。取樣前進(jìn)行分析,確保樣品穩(wěn)定。5.固相提取5.1固相提取柱的5.1.1柱管為血清級聚丙烯(也有玻璃),一般為注射器性質(zhì)。柱管下斷有凸頭,尺寸標(biāo)準(zhǔn)化。5.1.2燒結(jié)墊聚乙烯是一種常用的燒結(jié)墊材料。如有特殊要求, 血漿解凍箱也可選用碳化硅或不銹鋼片。

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